产品货号:
M20242
中文名称:
StuI内切酶
英文名称:
Stu I Endonuclease
产品规格:
100T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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Stu I是经过基因工程重组的快速限制性内切酶,适用于质粒DNA、PCR产物或基因组DNA等的快速酶切。
本制品含通用的Buffer和Color Buffer,其中Color Buffer含红色和黄色示踪染料,酶切产物可直接用于凝胶电泳。Color Buffer的红色染料与2500bp双链DNA片段在1%琼脂糖凝胶中迁移速率接近;黄色染料与10bp双链DNA片段在1%琼脂糖凝胶中迁移速率接近。
组分 | 规格 |
Stu I | 100μL |
10×Buffer | 1mL |
10×Color Buffer | 1mL |
保存:-20℃,有效期2年。
- Stu I的同裂酶有:Eco147 I,Pce I,SseB I。
- 不同DNA中的Stu I酶切位点数量:
λDNA ΦX174 pBR322 pUC57 pUC18/19 SV40 M13mp18/19 Adeno2 6 1 0 1 0 7 0 11 - DNA甲基化修饰对Stu I酶切影响:
Dam Dcm CpG EcoKI EcoBI 无影响 剪切受影响 无影响 无影响 无影响
- 若进行双酶切或多酶切,每种快速内切酶的用量为1μL,且所有内切酶的体积总和不得超过总反应体系的1/10。可根据需要适当扩大反应体系。
- 若同时使用的几种快速内切酶的最适反应温度不同,则应先以最适温度低的酶开始酶切,再添加最适温度较高的酶,并在其最适反应温度下进行酶切。
- 本制品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
- DNA快速酶切流程
- 在冰上按下表配制反应体系:
成分 质粒DNA PCR产物 基因组DNA ddH2O 15μL 16μL 30μL 10×Buffer 2μL 3μL 5μL 底物DNA 2μL(≤1μg) 10μL(~0.2μg) 10μL(5μg) Stu I 1μL 1μL 5μL 总体积 20μL 30μL 50μL - 若底物DNA为PCR产物,建议使用经纯化的PCR产物。若使用未经纯化的PCR产物,可将10×Buffer或10×Color Buffer减少至2μL。
- 轻轻吸打或轻弹管壁混匀反应液。切勿涡旋。瞬时离心收集挂壁液滴。
- 对于质粒DNA,37℃孵育15min;对于PCR产物,37℃孵育15~30min;对于基因组DNA,37℃孵育30~60min。
- 可选步骤:80℃孵育20min可使酶失活,停止反应。
- 若使用10×Color Buffer,酶切产物可以直接进行上样电泳。
- 在冰上按下表配制反应体系:
- 适用于质粒DNA的扩大反应体系
DNA 1μg 2μg 3μg 4μg 5μg Stu I 1μL 2μL 3μL 4μL 5μL 10×Buffer 2μL 2μL 3μL 4μL 5μL 总体积 20μL 20μL 30μL 40μL 50μL - 若总反应体系大于20μL,可适当增加孵育时间,尽量使用水浴、金属浴或沙浴。
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